›› 2012, Vol. 24 ›› Issue (1): 14-19.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2012.01.004
芮 萌,丛 梅,段蕴铀,侯春梅
RUI Meng,CONG Mei,DUAN Yun-you,HOU Chun-mei
摘要: 目的: 观察紫杉醇对3种不同p53基因型肺癌细胞的作用。方法:以不同浓度紫杉醇 (0.1 、1.0 、10 、100 、1 000 nmol/L)分别作用肺癌细胞A549、H322、H1299不同时间 (4、12、24、48、96 h),实验同时设阴性对照组 (不加紫杉醇)和空白对照组 (只加细胞培养液)。采用MTT、流式细胞术、Western blotting检测细胞的生长及细胞周期、凋亡、乙酰化微管蛋白、p53蛋白等指标变化。结果:紫杉醇对3株肺癌细胞的生长抑制作用均随着作用时间的延长而增强 (P<0.05);不同浓度紫杉醇对3株细胞生长的影响也存在差异 (P<0.05)。3株细胞中A549细胞半数抑制浓度相对较低,但3株细胞间对紫杉醇敏感性的差异无统计学意义 (P>0.05)。紫杉醇10 nmol/L作用时,3株细胞G2/M期变化趋势基本一致,1 000 nmol/L作用时,A549细胞G2/M期比例与作用时间呈正相关 (P<0.05),H322和H1299的G2/M细胞于24 h达高峰,作用后期H1299出现异常多倍体;同浓度紫杉醇作用的各株肺癌细胞的凋亡呈时间依赖性,但1 000 nmol/L组诱导的细胞凋亡比10 nmol/L组更晚出现。浓度依赖性实验中,10 nmol/L诱导凋亡比例最高;紫杉醇浓度≤100 nmol/L时,G2/M期比例随浓度增加而增高 (P<0.05);紫杉醇浓度≥100 nmol/L时,各肺癌细胞株G2/M期比例间的差异无统计学意义。凋亡和G2/M期阻滞无相关性 (P>0.05)。紫杉醇作用后,A549细胞p53蛋白呈浓度和时间依赖性增加,H322细胞p53蛋白无明显变化。3株细胞乙酰化微管蛋白均较对照组显著上升 (P<0.05)。结论:紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性。紫杉醇可增加野生型p53蛋白表达,诱导p53依赖和非p53依赖的两种凋亡途径,p53基因型影响了高浓度紫杉醇对肺癌细胞的周期阻滞作用,但对紫杉醇化疗敏感性无显著影响。